Coliformes

μ- NOTA 5

By Víctor Deroncelé

Coliforme significa con forma de coli, lo cual hace referencia al representante principal de este grupo dentro de la familia Enterobacteriaceae, Escherichia coli, descubierta por el bacteriólogo alemán Theodor von Escherich en 1860. Von Escherich la bautizó como bacterium coli (\»bacteria del intestino\», del griego κολον, kolon, \»intestino\»).  En la actualidad, el grupo coliforme se define como todos aquellos bacilos cortos, Gram-negativos, aerobios y anaerobios facultativos, que fermentan la lactosa con producción de gas en 48 horas a 37ºC.

El término Coliforme no tiene un estado taxonómico. La OMS define a los coliformes como “bacterias gramnegativas con forma de bastón, capaces de crecer en presencia de sales biliares u otros agentes tensoactivos similares con propiedades inhibidoras del crecimiento, y capaces de fermentar lactosa a 35–37°C con la producción de ácido, gas y aldehído en 24 a 48 horas. También son oxidasa negativa, no forman esporas y muestran actividad de β-galactosidasa”.

El grupo de las coliformes originalmente estaba formado por solo 4 géneros de la familia Enterobacteriaceae: Escherichia, Enterobacter, Klebsiella y Citrobacter. La inclusión de las cepas de este género se basaba fundamentalmente en las características morfológicas y en la capacidad de fermentar lactosa. Sin embargo, esta clasificación ha cambiado, y lo coliformes incluyen a aquellas enterobacterias con la capacidad de producir la enzima b-galactosidasa, basada en la prueba del ONPG (o-nitrofenil-β-galactopiranósido), además de poseer una serie de características bioquímicas y moleculares.

En la actualidad hay 19 géneros en el grupo de los coliformes, y todos ellos son miembros de la familia Enterobacteriaceae. Aeromonas, que pertenece a la familia Aeromonadaceae, también se conoce como miembro del grupo de los coliformes, pero no todos aceptan esta inclusión.  Y es que las Aeromonas también tienen la capacidad de producir galactosidasa, y muchas especies fermentan lactosa a 37 °C…. pero son oxidasa positivas……..todos los demás coliformes son oxidasa negativos.

Bacterias Coliformes¹:

Clasificación de las bacterias Coliformes

No todas las bacterias de este grupo  son de origen fecal, algunos coliformes no cumplen con esta caracterítica. El grupo de los coliformes se subdivide en tres:

1. Coliformes totales
2. Coliform fecales
3. E-coli

Coliformes Totales (CT)

Aquí se incluyen los 19 géneros. Viven en el suelo, el agua, en la vegetación en descomposición y en el tracto gastrointestinal de los animales de sangre caliente. La gran mayoria son especies no patógenas (algunas son oportunistas) para los humanos.

Actualmente, se consideran un excelente indicador de la eficiencia de los procesos de limpieza y desinfección, así como de calidad sanitaria en agua, vegetales y diversos productos procesados. La presencia de coliformes en el agua indica la contaminación bacteriana reciente y constituye un indicador de degradación de los cuerpos de agua.

Su determinación se basa generalmente en la capacidad de fermentar lactosa. Se pueden utilizar los métodos del número más probable (NMP), mediente el recuento en placa utilizando agar bilis-rojo violeta, en el cual las colonias fermentadoras de lactosa producen un viraje del indicador de pH; por filtración en membrana e incubación en medios adecuados, por métodos rápidos como Petrifilm^TM  y reacciones cromogénicas o fluorogénicas.

Coliformes Fecales (CF)/ Coliformes termotolerantes.

Este subgrupo incluye géneros de coliformes que se encuentran específicamente en el tracto gastrointestinal y en las materias fecales de animales de sangre caliente, incluidos los humanos. Actualmente se les conoce como como \»coliformes termotolerantes\» porque pueden prosperar y fermentar la lactosa a 44ºC. Además, en este subgrupo contiene géneros como Escherichia que normalmente se encuentra en las heces y otros géneros como Klebsiella, Enterobacter y Citrobacter, que no necesariamente se encuentran en las heces.

Los CF toleraran las sales biliares y otros tensoactivos similares y fermentan la lactosa, liberando ácido y gas a 44 °C. Su presencia en el agua u otros comestibles indica contaminación con materia fecal de animales de sangre caliente. Y, aunque su presencia no necesariamente garantiza la presencia de patógenos, si que indica un mayor probabilidad de la presencia de estos patógenos en las muestras analizadas.

La determinación se hace a partir de la segunda etapa (confirmativa) del método de NMP, cultivando en caldo lactosado con incubación a 44,5° C.

1. coli es un subgrupo de coliformes termotolerantes, que incluye únicamente cepas de la bacteria E. coli. Es la especie principal de coliforme que se aisla en  agua y otros comestibles. E. coli generalmente se encuentra en el tracto gastrointestinal y en las materias fecales de los animales de sangre caliente; por lo tanto, su presencia indica una altisima probabilidad de  contaminación fecal. Varias cepas de E. coli son patógenas de modo que  su presencia tambien sugiere una mayor probabilidad de la presencia de patógenos.
2. coli se caracteriza por ser coliforme termotolerante (fermenta lactosa a 44,5° C) que produce indol a partir de triptofano y produce glucuronidasa, características que se usan para su identificación en laboratorio, generalmente en la etapa final del NMP o de alguno de los otros métodos, incluyendo Petrifilm.

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Referencias:

1-  Leclerc H, Mossel DAA, Edberg SC, Struijk CB. Advances in the bacteriology of the coliform group: their suitability as markers of microbial water safety. Annual review of microbiology. 2001;55:201.

2–  ISO 48321:2006. Microbiology of food and animal feeding – Horizontal method for the detection and enumeration of coliforms – Most probable number technique

3–  ISO 4832:2006. Microbiology of food and animal feeding – Horizontal method for the enumeration of coliforms – Colonycount technique.

4- ISO 7251:2005. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection and enumeration of presumptive Escherichia coli. Most probable number technique.

5- ISO 16649-1:2001. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of betaglucoronidase-positive Escherichia coli. Part 1: Colony-count technique at 44 degrees C using membranes and 5-bromo-4- chloro-3-indolyl beta D-glucoronide.

6- ISO 16649-2:2001. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of betaglucoronidase-positive Escherichia coli. Part 2: Colony-count technique at 44 degrees C using 5-bromo-4-chloro-3-indolyl beta D-glucoronide.

7- ISO 16649-3:2001. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of betaglucoronidase-positive Escherichia coli. Part 3: Detection and most probable number technique using 5-bromo-4-chloro-3-indolyl beta D-glucoronide.