
μ- NOTA 35
By Víctor Deroncelé
Se presenta el caso de una mujer de 32 años, en el tercer trimestre de gestación, que acude al servicio de urgencias con un cuadro clínico de fiebre persistente (39 °C), cefalea intensa, rigidez en el cuello y alteraciones del estado mental. La paciente refiere haber consumido recientemente quesos blandos y otros productos lácteos no pasteurizados, lo que aumenta la sospecha de una infección transmitida por alimentos contaminados. Además, presenta signos de sepsis, evidenciados por escalofríos, taquicardia y una presión arterial ligeramente baja. La afectación del sistema nervioso central y la condición de embarazo hacen que el diagnóstico y tratamiento oportuno sean cruciales para evitar complicaciones graves en la madre y el feto. La combinación de estos hallazgos clínicos orienta hacia la posibilidad de una infección por un patógeno alimentario atípico, cuyo diagnóstico se confirmará a través de pruebas microbiológicas especializadas.
- Metodología Microbiológica
Muestras obtenidas
- Tipo de muestra:
- Líquido cefalorraquídeo (LCR) obtenido mediante punción lumbar.
- Muestras de sangre (hemocultivos).
Justificación de las pruebas microbiológicas
Ante la sospecha clínica de sepsis y meningitis en una paciente embarazada con antecedentes de consumo de alimentos no pasteurizados, se optó por un abordaje integral que combine métodos tradicionales y moleculares:
- Medios selectivos y de enriquecimiento:
- Se emplearon medios como Agar Oxford o PALCAM, diseñados para favorecer el crecimiento de bacterias implicadas en infecciones alimentarias, permitiendo la diferenciación de otros microorganismos.
- Pruebas bioquímicas y fenotípicas:
- La característica motilidad “tumbling” a temperatura ambiente y la producción de hemólisis débil en agar sangre son indicativas de un patógeno que se comporta de manera atípica en comparación con otros agentes causales de meningitis.
- Métodos moleculares:
- La PCR se utilizó para detectar genes específicos (por ejemplo, hly o prfA) que confirmen la presencia del microorganismo sospechoso.
- MALDI-TOF:
- La identificación mediante espectrometría de masas se aplicó para obtener una confirmación rápida y precisa a nivel de especie.
- Antibiograma:
- Se realizó de rutina para definir el perfil de susceptibilidad del aislado y orientar el tratamiento, especialmente importante en el contexto de una paciente embarazada.
Cultivo y aislamiento
- Medios de cultivo utilizados:
- Agar Oxford o PALCAM para favorecer el crecimiento selectivo del patógeno.
- Agar sangre para evaluar la hemólisis.
- Condiciones de incubación:
- Incubación a 37 °C durante 24-48 horas en condiciones aerobias, con evaluación de la motilidad a 25 °C para observar el característico “tumbling motility”.
Pruebas bioquímicas
- Catalasa:
- El patógeno es catalasa positivo.
- Motilidad:
- Se realizó la prueba de motilidad en medio semisólido y a temperatura ambiente (25 °C), donde se observó el patrón de “tumbling motility” característico.
- Hemólisis:
- En agar sangre, se observó una hemólisis beta débil.
Métodos moleculares
- PCR:
- Se amplificaron fragmentos específicos del gen hly (listeriolysina O) y/o prfA, lo cual confirma la presencia del patógeno en las muestras.
MALDI-TOF
- Aplicación:
- Se utilizó para identificar el aislado basándose en su perfil proteico único, permitiendo una confirmación rápida y precisa a nivel de especie.
Antibiograma
Se realizó un antibiograma mediante difusión en agar Mueller-Hinton, conforme a las directrices del CLSI (2022). Esto permitió determinar el perfil de susceptibilidad del aislado, confirmando su sensibilidad a ampicilina (con o sin gentamicina), que es el tratamiento de elección en listeriosis durante el embarazo.
- Resultados
| Prueba | Resultado |
| Crecimiento en Agar Oxford/PALCAM | Colonias pequeñas, con apariencia característica y moderada hemólisis |
| Crecimiento en Agar Sangre | Hemólisis beta débil |
| Prueba de Catalasa | Positiva |
| Prueba de Motilidad | Positiva; se observa \»tumbling motility\» a 25 °C |
| PCR (genes hly y/o prfA) | Positiva, confirmando la presencia del patógeno sospechoso |
| Identificación mediante MALDI-TOF | Confirmación de la identidad del aislado a nivel de especie |
| Antibiograma | Sensible a ampicilina (con gentamicina si es necesario); patrón de resistencia documentado según protocolos CLSI |
- Análisis de Resultados
- La observación de crecimiento en medios selectivos (Agar Oxford/PALCAM) con características morfológicas típicas y una moderada hemólisis en agar sangre es compatible con el patógeno.
- La prueba de motilidad a 25 °C, donde se aprecia el “tumbling motility”, es un hallazgo distintivo.
- La detección molecular mediante PCR de los genes hly y/o prfA confirma la presencia del microorganismo sospechoso.
- La identificación mediante MALDI-TOF refuerza la confirmación diagnóstica, permitiendo una identificación precisa y rápida.
- La realización del antibiograma es fundamental para orientar la terapia antibiótica, lo que en este caso permitió elegir ampicilina (posiblemente en combinación con gentamicina) para el tratamiento.
- Los antecedentes epidemiológicos –consumo de productos lácteos no pasteurizados– junto con la presentación clínica (sepsis, meningitis y síntomas neurológicos) en una paciente embarazada, son indicativos de una infección grave por un patógeno alimentario, cuya identificación precisa es esencial para minimizar complicaciones materno-fetales.
- Identificación
La integración de los hallazgos obtenidos mediante cultivos en medios selectivos, pruebas bioquímicas (catalasa, motilidad y hemólisis), detección molecular (PCR de hly y/o prfA), confirmación por MALDI-TOF y el antibiograma, permitió concluir de manera definitiva que el microorganismo responsable del cuadro clínico es Listeria monocytogenes.
- Referencias
- Farber, J. M., & Peterkin, P. I. (1991). Listeria monocytogenes, a food-borne pathogen. Microbiological Reviews, 55(3), 476-511.
- Swaminathan, B., & Gerner-Smidt, P. (2007). The epidemiology of human listeriosis. Microbes and Infection, 9(10), 1236-1243.
- Allerberger, F., & Wagner, M. (2010). Listeriosis: a resurgent foodborne infection. Clinical Microbiology and Infection, 16(1), 16-23.
- Clinical and Laboratory Standards Institute. (2022). CLSI Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing M100 (32ª ed.).
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